RNDr. Jan Trbušek, Ph.D.

Vitamín D se stává v poslední době jedním z nejdiskutovanějších a také nejslibnějších laboratorních parametrů. Jeho široké využití v klinické praxi odráží skutečnost, že zhruba 3 % lidského genomu jsou přímo či nepřímo regulována vitamínem D. Navíc většina jaderných buněk vytváří tzv. receptory vitamínu D (VDR). To vše nasvědčuje tomu, že tento vitamín (resp. prohormon) hraje klíčovou roli v celé řadě metabolických dějů a jeho deficit může vést ke vzniku mnoha závažných onemocnění či klinických stavů (viz obrázek).
Z epidemiologických studií vyplývá vysoká globální prevalence deficitu vitamínu D (odhady hovoří o 40%–75% celosvětové populace), přičemž tento zůstává v řadě případů nediagnostikován.


V současné době je na trhu k dispozici pouze několik souprav ke stanovení vitamínu D, z nichž některé navíc nedetekují obě formy vitamínu D, tj. D2 a D3.

Novinkou na trhu je test firmy Abbott Laboratories určený ke kvantitativnímu stanovení 25-hydroxyvitaminu D [25(OH) vitamin D] v lidském séru a plazmě, které lze provádět na imunoanalytických systémech ARCHITECT.
Mezi nejdůležitější charakteristiky testu ARCHITECT 25-OH Vitamin D patří:

• detekce obou forem vitamínu D (D2 + D3)
• plně automatizované stanovení vitamínu D, včetně předpřípravy
• vynikající přesnost metody (% CV): 2,6–4,6 %
• vysoká korelace s LC-MS/MS metodou

První ohlasy uživatelů tohoto testu jsou velmi pozitivní, takže lze doufat, že díky metodě firmy Abbott se stanovení vitamínu D stane rutinním vyšetřením ve větším počtu laboratoří než tomu bylo doposud.

Jak citovat toto dílo? (údaje kurzívou doplňte sami)

RNDr. Jan Trbušek, Ph.D. RNDr. Jan Trbušek, Ph.D.: Vitamín D – stanovujete ho již ve své laboratoři? PO>STUDIUM [online] 31.1.2011, poslední aktualizace 31.1.2011 [cit. aktuální datum]. Dostupný z WWW: <URL adresa příslušné stránky>. ISSN 1803-8999

Firma Abbott Laboratories uvádí na náš trh nový test ARCHITECT CYFRA 21-1. CYFRA 21-1 je nádorový marker, který má diagnostické využití zejména u pacientů s nemalobuněčným karcinomem plic.

Plicní karcinom patří mezi nejčastější zhoubné nádory ve světě i u nás, kde reprezentuje asi 13 % všech onkologických onemocnění. Z hlediska přežití patří plicní karcinomy mezi malignity s nejvyšší úmrtností vůbec. Hlavním důvodem špatné prognózy je především pozdní diagnóza onemocnění.

Plicní nádory se liší zejména svojí histologickou strukturou a biologickými vlastnostmi jako jsou produkce nádorových markerů, růst a zakládání metastáz, lokalizace, klinické projevy aj. Na základě těchto kritérií rozlišujeme dva typy plicních karcinomů: malobuněčný a nemalobuněčný karcinom. Druhý jmenovaný představuje představuje zhruba 70 – 75% všech plicních nádorů. Základním markerem pro diagnostiku tohoto karcinomu s nejvyšší senzitivitou je právě CYFRA 21-1.

CYFRA 21-1 je solubilní fragment cytokeratinu 19. Vzniká při proteolytické degradaci cytoskeletálních prekurzorů jako následek buněčné nekrózy při onemocnění. Imunoanalytické metody ke stanovení hladiny fragmentu cytokeratinu 19 (a tedy i metoda firmy Abbott) využívají dvou specifických monoklonálních protilátek proti epitopům na fragmentu: BM19-21 a KS19-1.

Jak již bylo uvedeno, je CYFRA 21-1 hlavním markerem nemalobuněčného karcinomu plic, přičemž je produkována všemi jeho histologickými subtypy.
CYFRA 21-1 je významným markerem v diferenciální diagnostice karcinomu plic a spolu s ostatními nádorovými markery ji lze použít ke klasifikaci jednotlivých histologických typů. Hlavní oblastí využití tohoto markeru je monitorování průběhu onemocnění a úspěšnosti terapie, přičemž jeho koncentrace obvykle koreluje se stadiem onemocnění.

Jak citovat toto dílo? (údaje kurzívou doplňte sami)

RNDr. Jan Trbušek, Ph.D.: CYFRA 21-1. Důležitý nádorový marker karcinomu plic. PO>STUDIUM [online] 8.2.2011, poslední aktualizace 8.2.2011 [cit. aktuální datum]. Dostupný z WWW: <URL adresa příslušné stránky>. ISSN 1803-8999

Hlavním cílem terapeutického monitorování lékových hladin (TDM, Therapeutic Drug Monitoring), kdy se měří koncentrace léků v tělních tekutinách, je optimalizace a individualizace dávkování léků, přičemž toto monitorování v sobě kombinuje principy laboratorní medicíny a farmakologie. Problematika TDM je poměrně komplikovaná, protože vedle vlastní laboratorní analýzy je nutná znalost farmakologických vlastností stanovovaného léku.

Firma Abbott Laboratories vydala již před několika lety publikaci, která se věnovala problematice monitorování lékových hladin. Ta se vzhledem k aktuálnosti brzy stala vyhledávanou a žádanou, ale bohužel v současné době již také téměř nedostupnou pomůckou.
Společnost Abbott proto vyslyšela volání uživatelů po nové, modifikované a moderní publikaci, kterou je právě nabízený interaktivní klinický průvodce TDM.

Věříme, že tuto příručku uvítáte a že se stane užitečným pomocníkem ve Vaší každodenní práci.

Vlastní publikaci (PDF soubor o velikosti 4 MB) si můžete snadno stáhnout zde: TDM_interaktivni klinicky pruvodce.pdf

Návod k použití interaktivního klinického průvodce TDM:
Po otevření příručky Vás Adobe Reader požádá o povolení zobrazení souboru v celoobrazovkovém režimu (doporučujeme povolit). V příručce pak lze listovat kliknutím na směrové šipky v pravém dolním okraji stránky (event. kliknutím levým nebo pravým tlačítkem myši kdekoli na obrazovce). Do jednotlivých sekcí atlasu se můžete také přesunout kliknutím na název dané sekce v levé části obrazovky, v Obsahu („Table of Contents“) a vyhledávat tak podle jednotlivých skupin léků.

Jak citovat toto dílo? (údaje kurzívou doplňte sami)

RNDr. Jan Trbušek, Ph.D.: Nová interaktivní publikace Abbott Laboratories: Terapeutické monitorování lékových hladin (Therapeutic Drug Monitoring, clinical guide). PO>STUDIUM [online] 17.5.2011, poslední aktualizace 17.5.2011 [cit. aktuální datum]. Dostupný z WWW: <URL adresa příslušné stránky>. ISSN 1803-8999

Firma Abbott Laboratories uvádí na trh inovovaný test ke kvalitativnímu stanovení povrchového antigenu viru hepatitidy B - ARCHITECT HBsAg Qualitative II; spolu s tímto testem přichází na trh i metoda ARCHITECT HBsAg Qualitative II Confirmatory. Kvalitativní stanovení HBsAg je nezbytné pro diagnostiku infekce HBV a ke screeningovému vyšetření vzorků krve a plazmy s cílem předejít přenosu viru hepatitidy B na příjemce krve a krevních derivátů.

Povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) je nejdůležitějším markerem k určení aktivní (akutní nebo chronické) infekce HBV. Jedná se o první detekovatelný virový antigenem, který se během infekce objevuje. Existuje ve třech strukturálních formách (SHBs, MHBs, LHBs - malá, střední a velká forma; viz Obr. 1), přičemž je syntetizován infikovanými jaterními buňkami v množství výrazně převyšujícím počet molekul nutných k vytvoření nových virových částic. Nadbytečný materiál HBsAg je proto uvolňován do krve v podobě malých sférických nebo tubulárních struktur (viz Obr. 1). Počet částic obsahujících HBsAg tak dosahuje sérových hodnot až 1013 částic na mL, což je množství, které je snadno stanovitelné imunoanalytickými testy.

Obr. 1. Schéma viru HBV a HBsAg částic
Povrchový antigen viru hepatitidy B se vyskytuje ve třech strukturálních formách, které se liší svojí molekulovou hmotností – SHBs, MHBs, LHBs (malá, střední a velká forma)

Nový test ARCHITECT HBsAg Qualitative II se vyznačuje zejména zvýšením analytické a sérokonverzní senzitivity (vylepšený konjugát), přičemž specificita je srovnatelná s původní metodou, a také zlepšenou detekcí HBsAg „escape“ mutant.

HBsAg „escape“ mutanty vznikají vlivem mutace příslušného DNA regionu kódujícího povrchový antigen viru HBV (HBsAg). V důsledku toho dojde ke změně struktury proteinu (jeho aminokyselinové sekvence) a pokud je takto postižená oblast zvolena jako epitop diagnostického testu, může dojít k produkci falešně negativního výsledku.
Od roku 1988, kdy byly tyto mutantní formy viru popsány poprvé, jich byla nalezena celá řada, a to včetně oblasti na povrchovém antigenu pozičně vymezené aa 122–124. Právě tuto oblast na molekule si zvolila firma Abbott jako epitop pro své testy (viz Obr. 2). Jedná se totiž o úsek, který podléhá mutagenezi mnohem méně než region aa 139–147 používaný jako epitop ostatními diagnostickými testy na trhu - zde se také vyskytuje vůbec nejčastější mutace, substituce na pozici 145 (Gly-145-Arg).
Nález mutanty na pozici 123 (Thr-123-Ala) vedl ke snaze firmy Abbott upravit svoje testy tak, aby se vedle ostatních mutant zlepšil záchyt také této formy. Výsledkem toho je test ARCHITECT HBsAg Qualitative II, který mutace v příslušném regionu na rozdíl od konkurenčních testů detekuje.

K inovaci testu přispěl významnou měrou Abbott Global Surveillance Program, tzv. pozorovací program trvalého monitoringu chování virů HBV a HIV firmy Abbott, který sleduje vznik nových mutantních forem uvedených virů a napomáhá tak přizpůsobování diagnostických testů ve snaze detekovat všechny dosud známé genetické varianty.

Obr. 2. Schéma úseku HBsAg s vyznačením vzniku „escape“ mutant
Úsek HBsAg (resp. sHBsAg) pozičně ohraničený aa 122–147, proti kterému jsou namířeny protilátky používané v dostupných HBsAg testech (označuje se také jako „a“ determinanta), s vyznačením známých mutací (substitucí nebo insercí); červeně je označen epitop používaný v testech firmy Abbott, zeleně epitop ostatních testů.

Testy ARCHITECT HBsAg Qualitative II a ARCHITECT HBsAg Qualitative II Confirmatory jsou připraveny k dodání, přičemž v nejbližší době nahradí stávající produkty ARCHITECT HBsAg Qualitative a ARCHITECT HBsAg Qualitative Confirmatory. O změnách budou zákazníci firmy Abbott informováni také prostřednictvím dopisu.

Jak citovat toto dílo? (údaje kurzívou doplňte sami)

RNDr. Jan Trbušek, Ph.D.: Inovovaný test firmy Abbott ke stanovení povrchového antigenu viru hepatitidy B (HBsAg). PO>STUDIUM [online] 19.7.2011, poslední aktualizace 19.7.2011 [cit. aktuální datum]. Dostupný z WWW: <URL adresa příslušné stránky>. ISSN 1803-8999

HCV antigen je přímým markerem infekce hepatitidou C, jehož stanovení výrazně redukuje tzv. diagnostické okno. Časná detekce HCV infekce s využitím HCV antigenu se tak v současnosti stala jedním z nejvíce diskutovaných témat v diagnostice infekčních nemocí. Firma Abbott Laboratories nabízí uživatelům projektu CEVA online účast na mezinárodní webové audiokonferenci věnované této problematice s názvem „The Next Step in HCV Diagnosis: HCV Ag a New Marker for Early Detection of Active Infection“.
Přednášejícím bude dr. Paul Holder z Národní referenční laboratoře pro viry při Univerzitě v Dublinu v Irsku. Diskutována bude vedle přenosu infekce hepatitidy C a její klinické manifestace zejména otázka HCV antigenu jako časného markeru aktivní infekce a jeho využití v diagnostice HCV infekce, včetně zařazení HCV antigenu do nejnovějších testovacích quidelines. Další informace naleznete v přiložené pozvánce.
Audiokonference se uskuteční ve čtvrtek, 28. července od 16:00 středoevropského času. Účast na této audiokonferenci je bezplatná; stačí se pouze zaregistrovat.

Postup registrace:

1) Na internetové adrese http://www.eventsvc.com/abbottdiagnostics/ei/ si zvolíte časové pásmo Europe (Prague) – viz červená šipka; a pokračujete v registraci (viz zelená šipka):

2) Vyplníte registrační formulář (požadované údaje mají pouze informační funkci) a dokončíte registraci:

3) Registrace byla ukončena; potvrzení o úspěšné registraci obdržíte na e-mail, který jste uvedli v registračním formuláři: